肿瘤中浸润的T细胞长期暴露于肿瘤抗原的刺激下，往往会出现功能障碍。这种耗尽状态的特征为：细胞毒性效应功能丧失、PD1以及其他共抑制受体持续表达。
免疫检查点抑制(ICB)疗法是使用抗体来阻止程序性细胞死亡受体1 (PD1)结合程序性细胞死亡配体1 (PDL1)，从而重新激活和扩增耗尽的肿瘤反应性PD1+ CD8+ TILs。然而，大多数使用针对PD1/PDL1的抗体治疗的肺癌患者并没有获得持久的临床效果，因此，我们仍需更深入地了解肿瘤中CD8+ PD1+ T细胞的功能。
近期，OncoImmunology上发表了一篇研究性论文，介绍了非小细胞肺癌中（NSCLC）中肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的PD1表达对肿瘤T细胞功能和分子表达的影响。
研究人员从18个NSCLC标本(8个腺癌、10个鳞状细胞癌)中分离出了CD4+和CD8+记忆TILs，与对照组相比，这些TILs中的PD1表达升高。功能性研究发现，PBMCs、肿瘤和正常组织中分离的CD4+细胞，无论是否表达PD1，其对肿瘤细胞的杀伤能力均没有影响，而从肿瘤组织中分离出的CD8+PD1+ T细胞的杀伤能力显著降低。
肿瘤组织中高表达PD1的CD8+T细胞杀伤能力降低
图1：NSCLC中表达PD1的CD4+和CD8+记忆TILs的功能特征
敲除ID3后TILs杀伤能力增强
已有研究表明，转录调节因子ID3在人类黑色素瘤和NSCLC功能失调的TILs中表达丰富。研究人员从不同T细胞群的基因表达数据中发现，PD1+ CD8+ TILs的ID3表达升高，而且表达ID3的细胞主要为耗竭的CD8+T细胞(C6-LAYN)。研究人员通过siRNA敲除ID3后，CD8+ T细胞的杀伤能力显著提高，这表明，ID3可能是一种T细胞杀瘤效应的潜在调节因子。
图2：ID3的下调增强了CD8+ T细胞的效应功能
体外培养的记忆T细胞功能得到了恢复
使用患者肿瘤组织中扩增的自体TILs来治疗实体肿瘤是一种非常有前景的治疗方法。为了研究体外培养的TILs基因的表达和功能的变化，研究人员从NSCLC组织中分离出原代TILs，进行体外扩增培养后发现，体外培养的TILs细胞和原代TILs相比，其CD8+ PD1+ TILs和CD4+ PD1+ TILs的比例都显著降低，并且体外扩增的CD8+ PD1+ TILs和CD8+ PD1- TILs都表现出很强的杀伤肿瘤细胞的能力。
图3：体外培养的TILs PD1的表达下调并且杀伤能力得到恢复
总 结
本研究发现，从肿瘤组织分离的CD4+和CD8+记忆T细胞和未累及的癌旁组织分离的T细胞相比，PD1表达升高，多种耗竭基因表达，表明浸润于肿瘤的T细胞处于耗竭状态，其CD8+ PD1+记忆T细胞的增殖能力和杀伤能力均减弱。在体外培养一段时间后，TILs的增殖能力和杀伤能力均得到了恢复，并且敲除ID3可以增强其杀伤能力。从肿瘤组织中分离的TILs在体外培养后，耗竭相关的基因表达降低，细胞状态和功能得到了恢复。
由此可知，体外扩增培养可以获得大量的TILs，且体外培养可以恢复TILs的功能和状态。因此，使用自体TILs的过继细胞疗法(ACT) 是一种很有前景的治疗方法。
参考文献：
Lipp JJ, Wang L, Yang H, et al. Functional and molecular characterization of PD1+ tumor-infiltrating lymphocytes from lung cancer patients. Oncoimmunology. 2022 Feb 9;11(1):2019466.
